Enzimele de restricție sunt enzime care sunt capabile să deschidă sau să taie molecule de ADN în pete foarte specifice bazate pe secvența de baze a moleculei de ADN. Descoperirea și izolarea lor în a doua jumătate a secolului XX le -au oferit oamenilor de știință un instrument neprețuit și s -au extins rapid în domeniul biologiei moleculare. Electroforeza de agaroză este o tehnică pentru separarea bucăților de ADN care rezultă din utilizarea enzimelor de restricție. În această activitate, elevii vor efectua electroforeză de agaroză pe trei probe de ADN care au fost deja tratate cu enzime de restricție. Un eșantion a fost tăiat cu enzima hindiii, unul a fost tăiat cu enzima ecori și una a fost tăiată cu ambele enzime. Modelul rezultat al benzilor de ADN pe gelul de agaroză va arăta că fiecare enzimă afectează ADN -ul diferit. Studenții nu numai că vor afla despre procesul de electroforeză ADN, dar vor învăța tehnicile asociate procesului, cum ar fi configurarea unui gel de agaroză, încărcarea probelor de ADN în gelul de agaroză și colorarea gelului pentru a vizualiza benzile ADN. De asemenea, vor învăța cum să determine dimensiunile fragmentelor de ADN necunoscute după ce au examinat rezultatele lor. Setul include probe de ADN tratate special care nu necesită refrigerare sau îngheț, agaroză preparată care poate fi pur și simplu topită într-o baie de apă caldă sau cu microunde, tampon de electroforeză TBE și pete de ADN. Există suficient ADN pentru a rula 10 geluri.
Kit include:
Agaroză preparată de 200 ml, 0,8% soluție
500 ml Tris Borat ETA Buffer, 5x
60 ml pata ADN, 20x
100 ul ADN lambda/ecori digest cu colorant de încărcare
100 ul ADN lambda/hindiii digestie cu colorant de încărcare
100 ul ADN lambda/ecori, hindiii digest cu colorant de încărcare
Necesare, dar care nu sunt furnizate sunt camere de electroforeză de agaroză, surse de alimentare și micropipete capabile să măsoare 10µl.
